6、化学试剂灭菌法：适用于环境消毒以及不耐加热灭菌的医用器具、设备和设施等的消毒，也用于粉末注射剂 。
常用的灭菌方法有哪些?
微生物学实验常用的灭菌方法有哪些一般分为溼热灭菌法和干热灭菌法两种 。
一、溼热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高，是最常用的灭菌方法 。溼热灭菌法可分为：煮沸灭菌法、巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法、流通蒸汽灭菌法、和间歇蒸汽灭菌法 。
（1）煮沸灭菌法：将水煮沸至100摄氏度，保持5-10分钟可杀死细菌繁殖体，保持1-3小时可杀死芽胞 。在水中加入百分之一至百分之二的碳酸氢钠时沸点可达105摄氏度，能增强杀菌作用，还可去污防锈 。此法适用于食具、刀箭、载玻片及注射器等 。
（2）巴氏消毒法：一种低温消毒法，因巴斯德首创而得名 。有两种具体方法，一是低温维持法：62摄氏度维持30分钟；二是高温瞬时法：75摄氏度作用15-30秒 。该法适用于食品的消毒 。
（3）流通蒸气灭菌法：利用常压下的流通蒸汽进行灭菌 。
（4）间歇蒸汽灭菌法
（5）高压蒸汽灭菌法：103.4千帕蒸汽压温度达121.3摄氏度，维持15-20分钟 。
二、干热灭菌法是指在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌的技术 。一般有火焰灭菌法和干热空气灭菌法 。
（1）火焰灭菌法：是指用火焰直接烧灼的灭菌方法 。该方法灭菌迅速、可靠、简便，适合于耐火焰材料（如金属、玻璃及瓷器等）物品与用具的灭菌，不适合药品的灭菌 。
（2）干热空气灭菌法：是指用高温干热空气灭菌的方法 。该法适用于耐高温的玻璃和金属制品以及不允许溼热气体穿透的油脂（如油性软膏机制、注射用油等）和耐高温的粉末化学药品的灭菌，不适合橡胶、塑料及大部分药品的灭菌 。
临床上常用的灭菌的方法有哪些？一、物理方法
1、温度
利用温度进行灭菌、消毒或防腐，是最常用而又方便有效的方法 。高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活，从而起灭菌作用，低温通常起抑菌作用 。
1）干热灭菌法:
a.灼烧灭菌法：利用火焰直接把微生物烧死 。此法彻底可靠，灭菌迅速，但易焚毁物品，所以使用范围有限，只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌 。
b.干热空气灭菌法：这是实验室中常用的一种方法，即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中，升温至160°C，恒温1小时即可 。此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌 。
2）溼热灭菌法:
在同样的温度下，溼热灭菌的效果比干热灭菌好，这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高，容易变性 。另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力，从而加速蛋白质变性而迅速死亡 。
a.巴氏消毒法：有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量，如牛奶、酱油、啤酒等，所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物，这样既保持食物的营养和风味，又进行了消毒，保证了食品卫生 。该法一般在62°C，30分钟既可达到消毒目的 。此法为法国微生物学家巴斯德首创，故名为巴氏消毒法 。
b.煮沸消毒法：直接将要消毒的物品放入清水中，煮沸15分钟，即可杀死细菌的全部营养和部分芽孢 。若在清水中加入1%碳酸钠或2%的石炭酸，则效果更好 。此法适用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒 。
c.间歇灭菌法：上述两种方法在常压下，只能起到消毒作用，而很难做恭完全无菌 。若采用间歇灭菌的方法，就能杀灭物品中所有的微生物 。具体做法是：将待灭菌的物品加热至100°C，15~30分钟，杀死其中的营养体 。然后冷却，放入37°C恒温箱中过夜，让残留的芽孢萌发成营养体 。第2天再重复上述步骤，三次左右，就可达到灭菌的目的 。此法不需加压灭菌锅，适于推广，但操作麻烦，所需时间长 。
d.加压蒸汽灭菌法：这是发酵工业、医疗保健、食品检测和微生物学实验室中最常用的一种灭菌方法 。它适用于各种耐热、体积大的培养基的灭菌，也适用于玻璃器皿、工作服等物品的灭菌 。
加压蒸汽灭菌是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的，以大量蒸汽使其中压力升高 。由于蒸汽压的上升，水的沸点也随之提高 。在蒸汽压达到1.055公斤/厘米2时，加压蒸汽灭菌锅内的温度可达到121°C 。在这种情况下，微生物（包括芽孢）在15~20分钟便会被杀死，而达到灭菌目的 。如灭菌的对象是砂土、石蜡油等面积大、含菌多、传热差的物品，则应适当延长灭菌时间 。
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