在加压蒸汽灭菌中,要引起注意的一个问题是,在恒压之前,一定要排尽灭菌锅中的冷空气,否则表上的蒸汽压与蒸汽温度之间不具对应关系,这样会大大降低灭菌效果 。
3)影响灭菌的因素
a.不同的微生物或同种微生物的不同菌龄对高温的敏感性不同 。多数微生物的营养体和病毒在50~65°C,10分钟就会被杀死;但各种孢子、特别是芽孢最能抗热,其中抗热性最强的是嗜热脂肪芽孢杆菌,要在121°C,12分钟才被杀死 。对同种微生物来讲,幼龄菌比老龄菌对热更敏感 。
b.微生物的数量多少显然会影响灭菌的效果,数量越多,热死时间越长 。
c.培养基的成分与组成也会影响灭菌效果 。一般地讲,蛋白质、糖或脂肪存在,则提高抗热性,pH在7附近,抗热性最强,偏向两极,则抗热能力下降,而不同的盐类可能对灭菌产生不同的影响;固体培养基要比液体培养基灭菌时间长 。
4)灭菌对培养基成分的影响
a.pH值普遍下降 。
b.产生混浊或沉淀,这主要是由于一些离子发生化学反应而产生混浊或......
什么叫灭菌?灭菌方法有哪几种灭菌的定义:
灭菌是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物,包括致病和非致病微生物以及芽孢,使之达到无菌保障水平 。经过灭菌处理后,未被污染的物品,称无菌物品 。经过灭菌处理后,未被污染的区域,称为无菌区域 。
微生物对灭菌剂的抵抗力取决于原始存在的群体密度、菌种或环境赋予菌种的抵抗力 。灭菌是获得纯培养的必要条件,也是食品工业和医药领域中必需的技术 。
将培养基、发酵设备或其他目标物中所有微生物的营养细胞及其芽胞(或孢子)杀灭或去除,从而达到无菌的过程 。
常用的灭菌方法:
热灭菌法
热灭菌法利用高温使微生物细胞内的一切蛋白质变性,酶活性消失,致使细胞死亡 。通常有干热、溼热和间歇加热灭菌等法 。
干热灭菌
火焰灼烧法或烘箱内热空气灭菌法称为干热灭菌法把金属器械或洗净的玻璃器皿放入电热烘箱内,在150~170℃下维持1~2小时后,可达到彻底灭菌(包括细菌的芽孢)的目的 。灼烧(incineration或bustion)是一种最彻底的干热灭菌法,应用范围仅限于接种环、接种针的灭菌或带病原菌的材料、动物尸体的烧毁等 。
溼热灭菌以沸水、蒸气和蒸气加压灭菌 。
巴氏消毒法:因最早由法国微生物学家巴斯德用于果酒消毒,故名 。这是一种专用于牛奶、啤酒、果酒或酱油等不宜进行高温灭菌的液态风味食品或调料的低温消毒方法 。
巴氏灭菌法就是溼热灭菌,此法有两种方式[1],①经典的低温维持法(lowtemperatureholdingmethod,LTH):在61.7~62.8℃下处理30分钟;②较现代的高温瞬时法(hightemperatureshorttime或flushpoint,HTST):在71.6℃或略高温度下处理15分钟 。在上述诸法中,以蒸气加压灭菌效果最好,可用常压蒸气灭菌,也可在高压蒸气锅中(一般使用1千克/厘米2)灭菌,其蒸气温度可达121℃,能将耐热的芽孢在30分钟内全部杀死 。但对某些易被高压破坏的物质,如某些糖或有机含氮化合物,宜在0.6千克/厘米2压力下(110℃)灭菌15~30分钟 。
煮沸消毒法:采用在100℃下煮沸数分钟的方法,一般用于饮用水的消毒 。
间歇灭菌
间歇灭菌连续3天,每天进行一次蒸气灭菌的方法 。此法适用于不能耐100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质 。一般是在正常大气压下用蒸气灭菌1小时 。灭菌温度不超过100℃,不致造成糖类等物质的破坏,而可将间歇培养期间萌发的孢子杀死,从而达到彻底灭菌的目的 。
辐射灭菌
辐射灭菌在一定条件下利用射线进行灭菌的方法 。较常用的有紫外线,其他还有电离辐射(射线加快中子等) 。波长在25000~80000纳米之间的激光也有强烈的杀菌能力,以波长26500纳米最有效 。辐射灭菌法仅限于某一定材料,因所需设备复杂,难于广泛使用 。
渗透压灭菌
渗透压灭菌利用高渗透压溶液进行灭菌的方法 。在高浓度的食盐或糖溶液中细胞因脱水而发生质壁分离,不能进行正常的新陈代谢,结果导致微生物的死亡 。
化学试剂灭菌
大多数化学药剂在低浓度下起抑菌作用,高浓度下起杀菌作用 。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等 。化学灭菌剂必须有挥发性,以便清除灭菌后材料上残余的药物 。
化学灭菌常用的试剂有表面消毒剂、抗代谢药物(磺胺类等)、抗生素、生物药物素抗生素是一类有微生物或其他生物生命活动过程中的合成的次生代谢产物或人工衍生物,他们在很低浓度时就能抑制或感染它种生物(包括病原菌,病毒,癌细胞等)的生命活动,因而可用作优良的化学治疗剂 。...
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